CARD9蛋白是天然免疫系統(tǒng)中C-type lectin 受體下游的結(jié)合蛋白，負責(zé)傳遞上游受體識別特定物質(zhì)后產(chǎn)生的信號。C-type lectin 受體主要包括dectin-1，dectin-2等，它們主要識別真菌或細菌細胞壁的組分。C-type lectin 受體激活后會介導(dǎo)胞內(nèi)的免疫信號，zui終誘導(dǎo)NF-kB的激活與炎性因子的釋放。

zui初時CARD9蛋白被發(fā)現(xiàn)與自身免疫病[比如IBD（immune bowel disease），強直性脊柱炎等等] 有關(guān)，CARD9蛋白相關(guān)基因突變的患者中也觀察到嚴(yán)重的真菌感染。后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)CARD9蛋白位于C-type lectin受體下游，以Dectin-1為例，當(dāng)Dectin-1受到其配體b-glucans激活后，引發(fā)dectin-1的磷酸化，從而導(dǎo)致下游激酶syk的磷酸化與激活，syk能夠進一步激活PKCδ，而激活后的PKCδ將CARD9蛋白231位的*磷酸化。激活后的CARD9能夠與另外兩個蛋白：BCL10，MALT1結(jié)合形成三元復(fù)合體，從而激活NF-kB信號。

那么除此之外CARD9還有沒有其它的作用呢？從氨基酸組成角度分析，我們知道CARD9蛋白N端有一個CARD結(jié)構(gòu)域，而其C端氨基酸序列的定性與功能還不清楚。在zui近的一項研究中，來自哈佛醫(yī)學(xué)院的Ramnik J. Xav研究組發(fā)現(xiàn)了CARD9蛋白 C端在天然免疫調(diào)控過程中的作用，相關(guān)結(jié)果發(fā)表在zui近一期的《immunity》雜志上。

首先，作者們在人群中尋找并收集到了多種天然的CARD9蛋白突變類型，通過比較發(fā)現(xiàn)，這些天然的突變體大多集中在CARD9的C端。之前已知的一類CARD9突變（S12N）能夠?qū)е禄颊吒尤菀谆糏BD，而其C端缺失之后（△11），無論是否存在上述突變，患者對IBD的抵抗性均明顯提高。這一結(jié)果說明CARD9蛋白的C端在天然免疫信號傳導(dǎo)中具有重要的作用。

為了進一步研究C端的缺失是如何引發(fā)上述保護效應(yīng)的，作者們將兩類不同的CARD9突變（S12N，S12N△11）轉(zhuǎn)入CARD9-/-的小鼠骨髓樹突狀細胞中。通過DECTIN等受體的特異性刺激，觀察下游炎性因子的釋放。結(jié)果顯示：在S12N存在的情況下，特異性的刺激能夠引發(fā)強烈的炎性因子的釋放（TNF-a，IL-6），而當(dāng)轉(zhuǎn)入S12N△11后，刺激狀態(tài)下TNF-a，IL-6的釋放受到了明顯的抑制。這一結(jié)果肯定了CARD9 C端對免疫信號傳遞的作用。另外，作者將C端缺失的CARD9突變體轉(zhuǎn)入野生型的人源單核細胞系THP-1以及原代單核細胞中，結(jié)果顯示，這一突變體能夠競爭性地抑制內(nèi)源CARD9的活性，從而抑制炎性因子的釋放。

那么CARD9的C端到底扮演了什么樣的角色呢？通過親和層析與質(zhì)譜技術(shù)，作者們鑒定出了特異性與CARD9 C端相互作用的蛋白TRIM62。這一發(fā)現(xiàn)得到了后續(xù)生化與顯微成像技術(shù)的驗證。接下來，作者研究了上述蛋白質(zhì)的相互作用的生物學(xué)效應(yīng)。由于TRIM62蛋白能夠特異性的將靶蛋白進行泛素化修飾，作者對此進行了檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：TRIM62可以催化CARD9蛋白K27位的泛素化修飾，而不能催化C端缺失突變的泛素化修飾。

之后，作者希望了解他們發(fā)現(xiàn)的泛素化修飾是否決定了CARD 9的生物學(xué)功能。通過構(gòu)建CARD 127位的賴氨酸突變體（即將TRIM62介導(dǎo)的泛素化的關(guān)鍵位點進行突變），發(fā)現(xiàn)該突變體也不能被成功泛素化。同時也不能介導(dǎo)炎性因子的釋放。

zui終，作者比較了野生型小鼠與TRIM62-/-小鼠在白色念珠菌感染過程中的反應(yīng)差異。結(jié)果顯示，突變體小鼠對抗真菌的免疫反應(yīng)受到了嚴(yán)重的破壞，真菌感染能力大幅增強。

綜上，作者發(fā)現(xiàn)了CARD9蛋白在真菌感染中的特殊作用，并鑒定出了TRAM62的相關(guān)作用。