支原體檢測方法—分離法

分離培養(yǎng)法：
分離培養(yǎng)法是支原體檢測的金標(biāo)方法，其檢測度zui高。這種方法是從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣，并接種到zui適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會在這種瓊脂平板上*生長，zui終形成明顯可見的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會出現(xiàn)假陰性結(jié)果，因此被譽(yù)為支原體檢測金標(biāo)準(zhǔn)。不過分離培養(yǎng)法也存在兩個弊端，一是檢測時間太長，支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。二是盡管可以檢測絕大多數(shù)支原體種類，分離培養(yǎng)法也有力所不及的時候。
如果你實(shí)在不想等這么久，或者希望在分離培養(yǎng)法的等待過程中先拿到初步結(jié)果，你可以試一試DNA、PCR或酶學(xué)檢測方法。不過需要注意的是，上述檢測方法都不能單獨(dú)檢出所有類型的支原體，而且靈敏度也沒有分離培養(yǎng)法高，所以結(jié)合使用兩種方法以獲得zui可靠的檢測結(jié)果。
DNA檢測需要將可疑樣品與指示細(xì)胞共同培養(yǎng)，因此一般需要幾天時間。DNA檢測所用的指示細(xì)胞通常是細(xì)胞質(zhì)區(qū)域較大的Vero細(xì)胞，如果原樣本中含有支原體，那么當(dāng)細(xì)胞DNA被熒光染料（如Hoechst染料）染色時，就可以在指示細(xì)胞的核周圍觀察到熒光斑點(diǎn)或熒光顆粒。分離培養(yǎng)法用來檢測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠，而DNA法可以準(zhǔn)確的將其檢測出來。