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PCR操作范例及反應(yīng)體系的組成一、PCR操作范例在一個典型的PCR反應(yīng)體系中需加入：適宜的緩沖液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐熱性多聚酶、Mg2和兩個合成的DNA引物。模板DNa94℃變性1min，引物與模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在循環(huán)前模板預(yù)變性3～5min；在末次循環(huán)后，樣品仍需繼續(xù)延伸3～5min以上，確保擴增的DNA為雙鏈DNA。為便于了解PCR反應(yīng)中各成份的組成，加入量和反應(yīng)條件，使人們以此為基礎(chǔ)，對不同的研究對象逐項改變來找到反應(yīng)條...

三種蛋白測定方法與標準曲線擬合一、蛋白濃度測定的常見方法1、考馬斯亮藍G250法測定蛋白濃度（bradford法）1）實驗原理考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度，是利用蛋白質(zhì)―染料結(jié)合的原理，定量的測定微量蛋白濃度的快速、靈敏的方法?？捡R斯亮藍G－250存在著兩種不同的顏色形式，紅色和藍色。它和蛋白質(zhì)通過范德華力結(jié)合，在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)和染料結(jié)合符合比爾定律（Beer’slaw）。此染料與蛋白質(zhì)結(jié)合后顏色有紅色形式和藍色形式，zui大光吸收由465nm變成595nm，通過...

小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養(yǎng)實驗實驗步驟一、取得小鼠胚胎1.性成熟母小鼠與種公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合籠。2.每天早上觀察母小鼠口。有乳白色或蛋黃色凍膠狀物(栓)即確定為懷孕。見栓當天上午定為懷孕的0.5d。3.取懷孕12.5～14.5d母鼠，斷頸處死，無菌條件下暴露子宮。4.用鑷子提起近子宮頸端，分離子宮系膜，剪斷子宮角。5.取出整個子宮，置于有PBS的平皿內(nèi)。用PBS洗滌三次，棄除表面殘余血跡。6.沿子宮系膜側(cè)剪開子宮，取出帶有胎膜的胚胎，置于另一盛有PB...

如何確定ELISA試劑盒購買數(shù)量？購買某種試劑盒的數(shù)量可以大體按照下述公式計算：X（盒）=處理數(shù)×重復(fù)次數(shù)÷單個試劑盒能夠測定樣品的次數(shù)。但是，因為測定中操作失誤，或者對某些樣品測定結(jié)果有懷疑，需要補測，所以實際購買時總是應(yīng)該從寬計算，通?？梢栽谟嬎阒祷A(chǔ)上加一個試劑盒，免得要重新購買試劑盒，耽誤時間。另外，鈺博生物不建議一次購買大量同種試劑盒，因為（1）萬一試劑盒質(zhì)量有問題，不至于造成太大損失；（2）防止儲存過久造成試劑盒失效；（3）防止因為樣品質(zhì)量問題，造成測定結(jié)果不可靠...

別為了變強壯而忽略了你的心臟！研究人員稱，長期使用合成代謝類固醇來增強肌肉可能會給心臟帶來負面影響。大量服用此類藥物的健身愛好者需要引起注意：有研究表明，長期使用合成代謝類固醇會使心臟正常功能受損，這類藥物液會造成動脈血管阻塞。哈佛醫(yī)學院精神病學教授，也是這項研究的合著者HarrisonPopeJr.博士表示：“意識到長期使用合成代謝類固醇會給心臟帶來的風險，這對臨床醫(yī)生至關(guān)重要?！焙铣纱x類固醇類似于合成的雄性性激素。研究人員稱，據(jù)估計有290萬到400萬的美國人曾服用過合...

培養(yǎng)皿的分類及注意事項培養(yǎng)皿的分類1.根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細胞培養(yǎng)皿和細菌培養(yǎng)皿。2.根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿，但進口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。3.根據(jù)大小的不同通常可分為直徑為35mm，60mm，90mm。150mm培養(yǎng)皿。4.根據(jù)分隔的不同又可分為2分隔培養(yǎng)皿，3分隔培養(yǎng)皿等。5.培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用...

實驗室常用貯存液的配制參數(shù)1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gN，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml。用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫?！咀⒁狻勘０肪哂泻軓姷纳窠?jīng)毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時應(yīng)戴手套和面具?？烧J為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹慎操作，因為它還可能會含有少量未聚合材料。一些...

免疫酶技術(shù)的優(yōu)勢ELISA試劑盒免疫酶技術(shù)是什么？免疫酶技術(shù)就是用酶(如辣根過氧化物酶)標記已知抗體(或抗原)，然后與組織標本在一定條件下反應(yīng)，如果組織中含有相應(yīng)抗原(或抗體)，抗原抗體相互結(jié)合形成的復(fù)合物中所帶酶分子遇到底物時，能催化底物水解、氧化或還原，產(chǎn)生顯色反應(yīng)，這樣就可以識別出標本抗原(抗體)分布的位置和性質(zhì)，通過圖像分析并可達到定量的目的。ELISA試劑盒免疫酶技術(shù)與免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)雖已廣泛應(yīng)用于免疫學的研究與診斷，但是熒光抗體染色標本不能長期保存，對組織...