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熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用熒光定量PCR(也稱TaqManPCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(PerkinElmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù),該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針來實(shí)現(xiàn)其定量功能的,與變通PCR相比,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點(diǎn)。本文擬就該技術(shù)的特點(diǎn)、原理和方法以及應(yīng)用作一簡要敘述。1特點(diǎn)FQ-PCR不僅具有普通PCR的高靈敏性,而且由于熒光探針的應(yīng)用,可以通過光電傳導(dǎo)系統(tǒng)直接探測PCR擴(kuò)增過程中熒光信號(hào)的變化以獲得定量結(jié)果,所以...
越來越流行的熒光免疫印跡在化學(xué)發(fā)光印跡中,獲得的信號(hào)是可變的,通常被認(rèn)為是半定量的。然而,在熒光印跡中獲得的信號(hào)是與熒光團(tuán)結(jié)合的抗體復(fù)合物中靶蛋白的豐度成正比的靜態(tài)值。下表列出了化學(xué)發(fā)光和熒光蛋白印跡之間的主要差異?;瘜W(xué)發(fā)光檢測熒光檢測工作原理酶標(biāo)二抗(e.g.HRP或AP)熒光二抗檢測方法膜曝光(常見)數(shù)字成像(少見)數(shù)字成像(激光掃描成像儀)MultiplexingCapabilityNoYes敏感性++++++信號(hào)穩(wěn)定性幾個(gè)小時(shí)幾周到幾個(gè)月線性動(dòng)態(tài)范圍15倍(薄膜檢測)...
細(xì)胞焦亡是個(gè)什么鬼?說起細(xì)胞凋亡大家都很熟悉,那細(xì)胞焦亡呢?可能很多人的*反應(yīng)是:什么鬼?細(xì)胞凋亡他弟?其實(shí)細(xì)胞焦亡本質(zhì)上是一種程序性細(xì)胞壞死,與細(xì)胞凋亡有許多不同。下面讓我們一起來好好了解下他。細(xì)胞焦亡(pyroptosis)是一種zui近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞程序性死亡方式,表現(xiàn)為細(xì)胞不斷脹大直至細(xì)胞膜破裂,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物的釋放進(jìn)而激活強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)。細(xì)胞焦亡是機(jī)體重要天然免疫反應(yīng),在拮抗感染和內(nèi)源危險(xiǎn)信號(hào)中發(fā)揮重要作用。相比于細(xì)胞凋亡(apoptosis),細(xì)胞焦亡發(fā)生的更快,并會(huì)...
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)*消化法2一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備1.動(dòng)物孕期14至16天的孕鼠(小鼠)。2.試劑無Ca2+和Mg2+的PBS(D-PBS)、0.05%*、0.53mmol/LEDTA溶液、MEF生長培養(yǎng)基(高糖DMEM加10%FBS)。3.器械眼科直剪3把、眼科直鑷3把、眼科彎鑷2把、玻璃平皿3套、200目尼龍濾網(wǎng)、50ml和15ml離心管和*片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。二、具體操作1.處死孕鼠,全身置于75%酒精里浸泡,然后在超凈臺(tái)中用剪刀和鑷子將...
經(jīng)驗(yàn)總結(jié):關(guān)于細(xì)胞消化一、酶消化法1.*。這是用得zui多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的*作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含鈣、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2.膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。二、離子...
ELISA試劑盒包括哪些規(guī)格?ELISA試劑盒規(guī)格以T/S來表示,其中T表示該試劑盒能夠測定的次數(shù),S表示該試劑盒能夠測定的樣品數(shù)。例如50T/24S,表示該試劑盒可以測定50次,但是能夠測定的樣品數(shù)為24個(gè)樣品(不包括重復(fù))。考慮到用戶使用方便和降低價(jià)格,科銘牌試劑盒常量法的規(guī)格以50T為主,而微量法以100T為主。人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒HumanVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAkit人血...
ELISA試劑盒常用哪種測定儀器?為了滿足絕大多數(shù)用戶的需要,鈺博牌試劑盒測定方法以分光光度法為主,其中常量法的反應(yīng)體系為1mL,而微量法的反應(yīng)體系為0.2mL。其中微量法也可以直接用酶標(biāo)儀來測定。但是,同一指標(biāo)的常量法與微量法試劑盒不可以通用,因?yàn)閮烧邷y定體系不同。人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAkit人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒HumanInterleukin-2receptor,IL-...
尊敬的客戶朋友及全體員工:2017年端午節(jié)即將來臨,根據(jù)國家有關(guān)規(guī)定,我公司端午節(jié)放假安排如下:一、放假時(shí)間安排:公司放假時(shí)間為5月28日至30日放假調(diào)休,共3天。5月27日(星期六)上班。二、溫馨提示:1、放假期間,各部門要安排好本部門的各項(xiàng)工作事項(xiàng),勿因放假影響工作。2、若以上放假安排對(duì)您造成不便,望諒解,屆時(shí)有緊急事宜急需辦理請(qǐng)與我公司相關(guān)人員提前,我們將為您盡快辦理。特此通知上海鈺博生物科技有限公司2017年5月27日
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