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支原體檢測(cè)方法—分離法分離培養(yǎng)法:分離培養(yǎng)法是支原體檢測(cè)的金標(biāo)方法,其檢測(cè)度zui高。這種方法是從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣,并接種到zui適宜支原體生長(zhǎng)的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會(huì)在這種瓊脂平板上*生長(zhǎng),zui終形成明顯可見(jiàn)的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,因此被譽(yù)為支原體檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。不過(guò)分離培養(yǎng)法也存在兩個(gè)弊端,一是檢測(cè)時(shí)間太長(zhǎng),支原體要長(zhǎng)出明顯克隆至少需要4周時(shí)間。二是盡管可以檢測(cè)絕大多數(shù)支原體種類(lèi),分離培養(yǎng)法也有力所不及的時(shí)候。如果你實(shí)在不...
各種顯色劑及其配制方法碘:不飽和或者芳香族化合物配制方法在100ml廣口瓶中,放入一張濾紙,少許碘粒。或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅膠紫外燈含共厄基團(tuán)的化合物,芳香化合物硫酸鈰:生物堿配制方法10%硫酸鈰(IV)+15%硫酸的水溶液氯化鐵*類(lèi)化合物配制方法1%FeCl3+50%乙醇水溶液.桑色素(羥基黃酮)廣譜,有熒光活性配制方法0.1%桑色素+甲醇茚三酮氨基酸配制方法1.5g茚三酮+100mLof正丁醇+3.0mL醋酸*肼(DNP)醛和酮配制方法12g*肼+60mL濃...
牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用與質(zhì)量要求生物技術(shù)已經(jīng)被世界各國(guó)視為一種高技術(shù),在整個(gè)科學(xué)技術(shù)中占據(jù)了特殊的顯著地位,特別是生命科學(xué)的發(fā)展更離不生物技術(shù),生命科學(xué)的發(fā)展備受各國(guó)的重視。我國(guó)在很多大學(xué)中都設(shè)立了生命*?,F(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過(guò)程中很多是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。基因工程乙肝疫苗很多是以CH...
CUT-OFF值的確定方法CUT-OFF值是被檢分析物的量值,用于確定結(jié)果高于還是低于臨床或分析決斷點(diǎn)。Cut-off值的設(shè)定給出了簡(jiǎn)要的敏感性和特異性組合。大多數(shù)免疫分析,來(lái)自感染和非感染人群的樣本之間有一個(gè)檢測(cè)結(jié)果的重疊區(qū),說(shuō)明一個(gè)實(shí)驗(yàn)一般不太可能有*的敏感性、特異性或預(yù)測(cè)值,在選擇cut-off值和報(bào)告檢測(cè)結(jié)果時(shí),應(yīng)考慮敏感性、特異性或預(yù)測(cè)值哪個(gè)更重要,并確定上述因素的平衡點(diǎn)。Galen和Gambino*的標(biāo)準(zhǔn)為:1、高敏感性:當(dāng)疾病是嚴(yán)重的,并且是可治療的,應(yīng)不能漏檢...
ELISA,如何判定cutoff值?確定CUT-OFF值的方法:確定CUT-OFF值的方法一:使用陰性血清測(cè)定結(jié)果均值的2或3倍作為陽(yáng)性判斷值:取一定數(shù)量(通常較少)的陰性血清樣本,使用已建立的酶免疫測(cè)定方法或試劑盒測(cè)定,如果上述陰性血清樣本的吸光度均值為0.05,則該次測(cè)定的陽(yáng)性判斷值為0.10或0.15。例如現(xiàn)有的試劑盒結(jié)果的判定以P/N或S/N≥2.1為陽(yáng)性,其依據(jù)即是以陰性參考血清的2倍作為陽(yáng)性判定值。這種Cut-off值設(shè)定方法,可以較為避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn),但假陰...
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作技巧ELISA試劑盒掌握了實(shí)驗(yàn)技巧之后,實(shí)驗(yàn)入門(mén)新手學(xué)起來(lái)都會(huì)快的多。本篇文章中的小竅門(mén)包含了要求、方法等技術(shù),為大家整理出了這些個(gè)人ELISA試劑盒小竅門(mén):1.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。3.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。4.要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。6.為防止樣品蒸發(fā)...
ELISA試劑盒樣本處理專(zhuān)家有方法怎么安全,快捷的處理樣本,樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)中關(guān)鍵的一步,稍有不小心將致使試驗(yàn)滿盤(pán)皆輸樣本ELISA試劑盒。一、均質(zhì)ELISA試劑盒安排樣本:肉、肝食品類(lèi)切細(xì),用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎,混合均勻。水產(chǎn)樣本:去掉樣品的非食用有些,食用有些切細(xì),用均質(zhì)器均漿;質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清潔。蛋類(lèi):鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充沛混勻。生果、蔬菜類(lèi):先用水洗去泥沙,然后除掉外表的水分,取食用有些。二、ELISA試劑盒振動(dòng)獲取,將獲取溶劑參加到裝有樣品的具...
細(xì)胞原代培養(yǎng):原理和應(yīng)用細(xì)胞原代培養(yǎng)是通過(guò)特殊分離方法從胚胎、組織器官以及外周血中分離獲得單細(xì)胞,置于合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定條件下,使細(xì)胞生存、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程。原代培養(yǎng)的“代”并非細(xì)胞的代數(shù),是指細(xì)胞培養(yǎng)的次數(shù),從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到*次傳代的階段,都屬原代培養(yǎng),一般持續(xù)1-4周。常見(jiàn)的原代培養(yǎng)過(guò)程如圖1所示。原代培養(yǎng)細(xì)胞直接來(lái)源于活體組織,體外培養(yǎng)也盡量模擬體內(nèi)環(huán)境,使得分離得到的細(xì)胞接近生物體內(nèi)的生活狀態(tài),可作為研究生物體細(xì)胞的生產(chǎn)、代謝、繁殖、凋...
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